详细介绍
品牌 | Bioss | 供货周期 | 现货 |
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应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药 |
AO染色液(1mg/ml)
保存条件 4℃避光保存,有效期12个月。
产品简介:
Acridine Orange (吖啶橙,) 属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA、RNA,属于异染性荧光染料。吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,可发出不同颜色的荧光(即着色特异性)。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO与RNA的结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。
AO染色液(1mg/ml)为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。AO染色常与EB染色合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。AO染色液工作浓度为8.5ug/ml。
使用说明:
1. 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用 PBS 清洗细胞 1 次,计数并调节细胞浓度至 10
6/ml。
2. 取适量的细胞悬液,加入 AcridineOrangeStain(1mg/ml),使 AO 终浓度为 8.5-10μg/ml,轻轻混匀。
3. 室温避光染色 15-20min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4. 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长488nm,阻断滤光片波长515nm),计数并拍照。
注意事项:
1. Acridine OrangeStain (1mg/ml) 不含破膜剂,较少单独使用。
2. 吖啶橙染色常与 EB 染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
3. 如有低温离心机进行离心效果更佳。
4. 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液(C02-04003)。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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