AO染色液(1mg/ml)

AO染色液(1mg/ml)

保存条件 4℃避光保存，有效期12个月。

产品简介：

Acridine Orange （吖啶橙,） 属于三环杂芳香燃料，可以标记DNA、RNA，属于异染性荧光染料。吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光（即着色特异性）。该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。因此AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。AO与核酸结合方式主要有：1、插入性结合，AO嵌入核酸双链的碱基对之间，这种结合方式主要为AO与DNA的结合，其荧光发射峰为530nm，激发后呈绿色荧光；2、静电吸引，带正电荷的AO与单链核酸的磷酸根（带负电荷）产生静电间的吸引结合，这种结合方式主要为AO与RNA的结合，其荧光发射峰为640nm，激发后呈红色荧光，少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。因此，吖啶橙嵌合到双链DNA分子中显绿色，与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色荧光。

AO染色液（1mg/ml）为储存液，使用时应稀释到合适浓度后使用。AO染色常与EB染色合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。AO染色液工作浓度为8.5ug/ml。

使用说明：

1.  收集细胞（采用流式细胞仪检测时，应先固定细胞），用 PBS 清洗细胞 1 次，计数并调节细胞浓度至 10

⁶/ml。

2.  取适量的细胞悬液，加入 AcridineOrangeStain（1mg/ml），使 AO 终浓度为 8.5-10μg/ml，轻轻混匀。

3.  室温避光染色 15-20min，滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。

4.  荧光显微镜下观察（激发滤光片波长488nm，阻断滤光片波长515nm），计数并拍照。

注意事项：

1.  Acridine OrangeStain （1mg/ml） 不含破膜剂，较少单独使用。

2.  吖啶橙染色常与 EB 染色合用，可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

3.  如有低温离心机进行离心效果更佳。

4.  操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液（C02-04003）。

5.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。