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脂质体2000转染试剂

简要描述:脂质体2000转染试剂
Lip2000 是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA 和 RNA)转染入真核细胞,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(脯乳动物细胞系)的转染。

  • 产品型号:C6031
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-03-29
  • 访  问  量: 60

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详细介绍

品牌自营品牌货号C6031
供货周期现货应用领域医疗卫生,化工,生物产业,制药

脂质体2000转染试剂

保存条件 2-4℃保存一年(避免冷冻)。

脂质体2000转染试剂

产品简介:

Lip2000 是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA 和 RNA)转染入真核细胞,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(脯乳动物细胞系)的转染。



质粒 DNA 转染:

对大多数细胞来说,DNA(µg)与 Lip2000(µI)的比例为 1:2~3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平,并能减少细胞毒性。

1.  以 24 孔板为例

a.  贴壁细胞:转染前一天,用 500 µI 不含抗生素的培养基接种 0.5-2×10

5 细胞,使之第二天能达到 70- 90%汇合。

b.  悬浮细胞:在准备 DNA-Lip2000 复合物之前,用 500 µI 不含抗生素的培养基接种 4-8×10

5 细胞即可。

2.  对每个转染样品,进行以下操作

a.  在eppendorf管里分别加入50 µI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA,轻柔混匀,制成DNA稀释液。

b.  在另一个eppendorf管里分别加入50 µI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和2.0 µI Lip2000(注意用前 先混 匀),轻柔混匀,制成Lip2000 稀释液,室温静置5分钟。

c.  将DNA稀释液和Lip2000稀释液混合,轻柔混匀,室温静置20分钟,形成DNA-Lip2000复合物。DNA-Lip2000复合物在室温下可稳定存在6小时。

3.  将DNA-Lip2000复合物加入到接种好的细胞中,将培养板轻轻地前后摇动,使复合物分散均匀。

4.  在37℃ 二氧化碳培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18-48小时。

5.  如果要筛选稳定细胞株,则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中,第二天加入选择性培养基进行筛选。


质粒DNA转染的优化为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响,可以对DNA和Lip2000的比例以及细胞密度进行优化,一般在1: 0.5~5的范围内优化DNA (µg)和Lip2000(µI)的比例。




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