5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

保存条件 Store at -20℃.

CAS号：7240-90-6

分子式：C14H15BrClNO6

分子量：408.63

MDL：MFCD00005666

级别：超纯

纯度：＞99%

外观/性状：白色至浅黄色粉末

溶解性：溶于DMSO，溶解度可达20mg/mL。也溶于DMF。

敏感性：对光敏感,易吸潮

用途：X-Gal是β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。

5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

配制储存液：

称取200mg X-Gal于15 mL 离心管，向其中加入10mL DMF，旋涡震荡使其充分溶解后，建议分装，-20℃避光保存，有效期可达6-12个月。

蓝白斑筛选：

1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右。

2）每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其终浓度达到1 mM）；

3）加入适量抗生素；

4）混匀后按照平板大小倒入适量培养基，待培养基冷却至室温后，接种细菌于37℃过夜培养。

2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面

1）于无菌超净工作台制备平板（如LB 琼脂板）；  2）取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均匀地涂布于准备好的平板上；

注：平板边缘较难充分涂布均匀，容易产生假阳性，因此，为了得到更好结果，建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

3）37℃孵育直至所有液体被吸收（30 min或更长）。接种细菌于37℃过夜培养。