万膜兔单抗内参 | 一支抗体，万张WB！

WB 是蛋白定性和定量的金标准，常应用于研究生物样品中蛋白丰度的变化。由于 WB 检测包含多个步骤，样品制备、上样或转膜等实验过程中任何细微的差异，都可能导致实验结论的不一致，甚至相悖。为了避免实验操作差异引起的实验误差，在任何 WB 检测实验中，都需要设定合适的内参。

内参即内部参照（Internal Control），可以帮助确定样品间表达水平的差异，以判断是由细胞裂解物的实际蛋白水平导致，还是由上样量的差异导致，需要强调的是内参抗体应该与实验抗体在相同的印迹上进行。因此选择的内参蛋白必须是实验样本中稳定表达的蛋白，一般会选择组成型表达且是细胞基本功能必需的管家蛋白（Housekeeping Proteins），如细胞骨架蛋白等。

在众多管家蛋白中，β-Actin 与 GAPDH 是科研中使用广泛的两款经典内参。二者分别为细胞骨架蛋白与糖代谢关键酶，在绝大多数常规细胞与组织样本中稳定表达。β-Actin、GAPDH 虽为通用内参，但并非万能：

-β-Actin：细胞骨架蛋白，细胞骨架重构、迁移模型样本表达易发生变化；

-GAPDH：糖代谢相关，细胞缺氧、糖代谢重塑、部分肿瘤模型中表达可能上调；

⚠实验前建议根据样本类型，合理挑选内参，必要时搭配双内参校正，数据更可靠。