TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是一种用于检测细胞凋亡过程中细胞核DNA断裂的试剂盒,其原理基于末端脱氧核糖核苷酸转移酶(TdT Enzyme)的作用,能够特异性地标记凋亡细胞,在科研领域应用广泛。
细胞凋亡时,基因组DNA会发生断裂,暴露出3'-羟基(3'-OH)末端。TUNEL试剂盒利用TdT酶将标记的核苷酸(如生物素-dUTP、FITC-dUTP或红色荧光素KeyFluor555-dUTP)连接到这些断裂的DNA末端,通过后续显色或荧光检测,特异性定位凋亡细胞。
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒类型与特点:
根据标记物和检测方法的不同,TUNEL试剂盒可分为以下类型:
显色型(POD法)
标记物:生物素-dUTP + 辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素。
显色反应:HRP催化DAB(二氨基联苯胺)产生棕色沉淀,光学显微镜下观察。
特点:无需荧光设备,成本低,适合普通实验室;但灵敏度略低于荧光法。
荧光型(FITC/TMR/KeyFluor555标记)
标记物:FITC-dUTP、TMR-dUTP或KeyFluor555-dUTP。
检测方法:荧光显微镜或流式细胞仪观察。
特点:
高灵敏度:可检测早期凋亡细胞。
多色检测:可与DAPI(核染色)或其他荧光标记联用,实现多参数分析。
快速简便:部分荧光型试剂盒支持一步染色,缩短实验时间。