MES缓冲液,又名2-吗啉乙磺酸,是一种常用的二元缓冲液。
MES缓冲液基本特性:
缓冲范围:MES缓冲液的缓冲范围通常在pH 5.5~6.7之间,这使得它在特定pH范围内的缓冲效果非常出色。
化学稳定性:MES缓冲液具有良好的化学稳定性,但遇强氧化剂易失效,且可以被H₂O₂氧化,不过由于氧化发生缓慢,预计不会对生物/生化系统产生重大影响。
物理性质:MES易溶于水,呈无色透明状,未调pH之前,MES溶液的pH位于2.5到5之间。
配制方法:
原料选择:MES粉末应选用纯度≥99%的生物试剂级,以避免杂质干扰。蒸馏水或去离子水电导率需≤0.1μS/cm。
配制步骤:
称量:根据所需浓度和体积,准确称取MES粉末。例如,配制1L 0.5M母液时,需称取97.06g MES(分子量195.2)。
溶解:将MES粉末缓慢加入水中,同时搅拌以促进溶解。可以先加800mL水进行磁力搅拌,待溶液透明后再进行后续操作。
调pH:使用1M NaOH或HCl精细调节溶液的pH至目标值。在调节过程中,pH计探头应浸入液面下1cm,每调整0.1单位需稳定30秒再读数。
定容:将溶液定容至所需体积,并用滤纸过滤以去除未溶颗粒。
分装与保存:将配制好的MES缓冲液分装并标注浓度、pH值、配制日期等信息。4℃保存的有效期约三个月,-20℃冻存可延长至一年。