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TC含量检测试剂盒的使用

更新时间:2023-02-14  |  点击率:869
  总胆固醇(TC)含量检测试剂盒的原理:
 
  TC 包括游离胆固醇和胆固醇酯,TC 是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇 (FC) 和游离脂肪酸 (FFA),从而把胆固醇酯 转化为 FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化 FC 氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;最后利用过氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰,其颜色深浅与 TC 含量成正比。
 
  总胆固醇(TC)含量检测试剂盒操作步骤:
 
  一、TC 的提取:
 
  1、组织中TC 的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:510的比例(建议称
 
  取约0.1g 组织,加入1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,8000g 4℃离心10min,取上清,即
 
  TC待测液。
 
  2、 细胞、细菌中TC 的提取:先收集400-500万细胞或细菌到离心管内,弃上清,加1mL
 
  试剂一,超声波破碎1min(强度20%,超声2s,停1s),8000g4℃离心10min,取上
 
  清,即TC 待测液。
 
  3、 血清(浆)等样品:直接测定。
 
  二、测定操作:
 
  1. 分光光度计预热30 min,调节波长到500nm,蒸馏水调零。
 
  2. TC 工作液置于37℃水浴30min。
 
  3.标准管:在1mL玻璃比色皿中依次加入50μLTC 标准品和150uLTC 工作液,混匀。
 
  静置24h 后于500nm处比色,记为A标准管。
 
  4.测定管:在1mL 玻璃比色皿中依次加入50μLTC 待测液和150μLTC 工作液,混匀,
 
  静置24h后于500nm 处比色,记为A测定管。
 
  注意:标准管只需测定一次。