苏木素-伊红染色试剂盒的使用说明

　　苏木素是一种有机物，化学式为C16H14O6，为褐色结晶粉末，用作核和染色质的染色剂。用于光度法测定钒、铝、锡(IV)、氟、铌、钽等。
 

　　苏木素和伊红在组织学上被经常使用，与碘液不同，这是一种染色剂。其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂，也就是磷钨酸与苏木素的混合物。苏木素染色剂经常为组织的研究使用。 明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂，展示核和细胞质结构。这些媒染剂的原理都是形成媒染剂-染料-组织复合体，从而显示颜色。使用的盐不同颜色也不同： 当用铁盐呈现深蓝色颜色沉淀，用铝盐通常显示蓝白色。下面分别介绍铝苏木素溶液和铁苏木素溶液。
 

　　苏木素-伊红染色试剂盒使用说明：
 

　　1. 样品处理
 

　　a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟，换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟，无水乙醇5分钟，90%乙醇2分钟，70%乙醇2分钟，蒸馏水2分钟。
 

　　b) 对于冰冻切片：经固定的切片置蒸馏水2分钟。
 

　　c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上，蒸馏水洗涤2分钟，换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。
 

　　2. 苏木素-伊红染色
 

　　a) 对于上述处理好的样品，用苏木素染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)，回收染色液后，用自来水冲洗去除残留的染色液，
 

　　b) 蓝化和分色：用自来水冲洗，待切片变成蓝色后，再用含0.5～1%盐酸的70%酒精溶液进行分色，脱去多余的染料(因为苏木精染色后，细胞核着色较深，细胞质及结缔组织纤维等亦稍着色，影响下步染色及观察)。然后再用自来水冲洗，使之蓝化，需5～10分钟。
 

　　c) 伊红染色：切片用蒸馏水浸洗后，放入1%伊红水溶液，浸染5～10分钟。
 

　　d) 脱水：将切片用蒸馏水洗去附在载玻片上的染液后，经70%、80%、90%酒精分色及脱水，再经95%酒精和2次*脱水，每级一般为2分钟。
 

　　e) 透明：切片入二甲苯2次，每次2分钟。
 

　　f) 封固：从二甲苯中取出切片，在切片的组织上滴加适量树胶，上面再加一盖玻片， 使树胶布满于盖玻片与载玻片之间的间隙，封固即告完成。将封好的切片标本放入烤箱，待盖玻片粘着牢固后，即获得可供长期观察和保存的H·E染色标本。
 

　　3. 进行其它染色
 

　　如果进行免疫荧光染色，伊红染色液染色后，70%乙醇洗涤2次，每次2分钟，再用PBS或生理盐水、TBS、TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟，然后就可以进行免疫荧光染色或其它的染色。