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苏木素-伊红染色试剂盒的使用说明

发表时间:2022-06-22  |  点击率:227
  苏木素是一种有机物,化学式为C16H14O6,为褐色结晶粉末,用作核和染色质的染色剂。用于光度法测定钒、铝、锡(IV)、氟、铌、钽等。
 
  苏木素和伊红在组织学上被经常使用,与碘液不同,这是一种染色剂。其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂,也就是磷钨酸与苏木素的混合物。苏木素染色剂经常为组织的研究使用。 明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂,展示核和细胞质结构。这些媒染剂的原理都是形成媒染剂-染料-组织复合体,从而显示颜色。使用的盐不同颜色也不同: 当用铁盐呈现深蓝色颜色沉淀,用铝盐通常显示蓝白色。下面分别介绍铝苏木素溶液和铁苏木素溶液。
 
  苏木素-伊红染色试剂盒使用说明:
 
  1. 样品处理
 
  a) 对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟,换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟,无水乙醇5分钟,90%乙醇2分钟,70%乙醇2分钟,蒸馏水2分钟。
 
  b) 对于冰冻切片:经固定的切片置蒸馏水2分钟。
 
  c) 对于培养细胞:用4%多聚甲醛固定10分钟以上,蒸馏水洗涤2分钟,换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
 
  2. 苏木素-伊红染色
 
  a) 对于上述处理好的样品,用苏木素染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间),回收染色液后,用自来水冲洗去除残留的染色液,
 
  b) 蓝化和分色:用自来水冲洗,待切片变成蓝色后,再用含0.5~1%盐酸的70%酒精溶液进行分色,脱去多余的染料(因为苏木精染色后,细胞核着色较深,细胞质及结缔组织纤维等亦稍着色,影响下步染色及观察)。然后再用自来水冲洗,使之蓝化,需5~10分钟。
 
  c) 伊红染色:切片用蒸馏水浸洗后,放入1%伊红水溶液,浸染5~10分钟。
 
  d) 脱水:将切片用蒸馏水洗去附在载玻片上的染液后,经70%、80%、90%酒精分色及脱水,再经95%酒精和2次无水酒精脱水,每级一般为2分钟。
 
  e) 透明:切片入二甲苯2次,每次2分钟。
 
  f) 封固:从二甲苯中取出切片,在切片的组织上滴加适量树胶,上面再加一盖玻片, 使树胶布满于盖玻片与载玻片之间的间隙,封固即告完成。将封好的切片标本放入烤箱,待盖玻片粘着牢固后,即获得可供长期观察和保存的H·E染色标本。
 
  3. 进行其它染色
 
  如果进行免疫荧光染色,伊红染色液染色后,70%乙醇洗涤2次,每次2分钟,再用PBS或生理盐水、TBS、TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟,然后就可以进行免疫荧光染色或其它的染色。
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